實驗

二甲(jia)基十二烷基氨基丙烷磺酸(suan)鹽(yan)（DPS；≥來自Fluka、癸酰-N-甲(jia)基葡糖(tang)苷(gan)（Mega-10；98%純(chun)）、α-CD和RB的99%）(～收到(dao)時使用來自Sigma的95%純(chun)度）。所有溶液(ye)均在從電阻率為18.2 MΩcm的Direct-Q微孔系統中獲得(de)的Milli-Q水中制備。

方法

使用芬蘭Kibron公司(si)的EZ-PI界(jie)面(mian)張力計測量(liang)界(jie)面(mian)張力[23]。該儀(yi)器配有(you)傳感器探頭和反(fan)應杯支架(jia)。將4 ml表(biao)面(mian)活性(xing)劑溶液(ye)引(yin)入反(fan)應杯并放置在反(fan)應杯支架(jia)上。所有(you)測量(liang)均(jun)在24.0±1°C下進(jin)行。

使用熒(ying)(ying)(ying)光(guang)偏(pian)(pian)振(zhen)儀系(xi)統(tong)（Beacon 2000）在(zai)25.0±0.2°C下進(jin)行所(suo)(suo)有熒(ying)(ying)(ying)光(guang)各向異性(xing)(xing)測(ce)量(liang)。RB用作熒(ying)(ying)(ying)光(guang)探針，其濃度(du)保持在(zai)0.1μM。分(fen)別(bie)使用570和630 nm的激發(fa)和發(fa)射波長測(ce)量(liang)熒(ying)(ying)(ying)光(guang)各向異性(xing)(xing)。當發(fa)射偏(pian)(pian)振(zhen)器平行或垂直于(yu)偏(pian)(pian)振(zhen)激發(fa)方向時，每個熒(ying)(ying)(ying)光(guang)強度(du)稱為I||或I┴,分(fen)別(bie)地各向異性(xing)(xing)是強度(du)差(cha)（I||-I）的比率┴)總(zong)強度(du)（I||+2I）┴)如等(deng)式1[24，25]所(suo)(suo)示：

給出的(de)各(ge)向異性值(zhi)是十(shi)個(ge)讀(du)數的(de)平均值(zhi)。

核磁共振

核磁(ci)共振譜(pu)記(ji)錄(lu)在(zai)BRUKER DRX600核磁(ci)共振光(guang)譜(pu)儀上，該(gai)光(guang)譜(pu)儀在(zai)14.1 T的場(chang)強下工作。分別在(zai)1 mM的Mega-10和DPS溶液中，用小份的α-環糊(hu)精(jing)滴定，最終濃度分別為64.7和68.1 mM。1D?在(zai)每個濃度下記(ji)錄(lu)1H-NMR譜(pu)。對于這(zhe)兩種表面活性劑，使用CH3基團的化學位移來跟蹤(zong)絡合(he)物的形成。

在(zai)(zai)任(ren)何給定的(de)(de)(de)α-環糊精濃度下(xia)，結合(he)表面活性劑分子(zi)的(de)(de)(de)分數(shu)都可(ke)以通過其信(xin)號的(de)(de)(de)化(hua)學位(wei)移(yi)來確定。客體分子(zi)在(zai)(zai)束(shu)縛(fu)態(tai)（δ束(shu)縛(fu)態(tai)）和(he)自(zi)由態(tai)（δ自(zi)由態(tai)）有不同的(de)(de)(de)化(hua)學位(wei)移(yi)。在(zai)(zai)自(zi)由形式和(he)束(shu)縛(fu)形式之(zhi)間(jian)的(de)(de)(de)平衡以及這兩種狀態(tai)之(zhi)間(jian)的(de)(de)(de)交換率（比(bi)共振頻率差快）的(de)(de)(de)情況(kuang)下(xia)，將僅(jin)觀(guan)(guan)察到一個(ge)具有觀(guan)(guan)測到的(de)(de)(de)化(hua)學位(wei)移(yi)（δobs）的(de)(de)(de)信(xin)號，即δ束(shu)縛(fu)和(he)δ自(zi)由之(zhi)間(jian)的(de)(de)(de)加(jia)權平均(jun)數(shu)。對(dui)于以下(xia)內容，我們定義了觀(guan)(guan)察到的(de)(de)(de)化(hua)學位(wei)移(yi)變化(hua)(?δobs）和(he)結合(he)時(shi)化(hua)學位(wei)移(yi)的(de)(de)(de)變化(hua)(?δ界）：

兩者之間的比率?δobs與?因(yin)此，δ束(shu)縛態相當于束(shu)縛客體分子的摩爾(er)分數：

[CDS]可以從關聯常數的定義中分離(li)出(chu)來：

式中(zhong)，[CD]f是自由(you)主體(ti)(ti)分子(zi)的(de)濃(nong)度，即(ji)CD，[S]f是自由(you)客體(ti)(ti)分子(zi)的(de)濃(nong)度，即(ji)表面活(huo)性劑，[CD]是絡(luo)合物(wu)的(de)濃(nong)度，即(ji)環糊精-表面活(huo)性劑絡(luo)合物(wu)。

Ka通過將等式6與[CDS]與[CD]0的實(shi)驗數(shu)據擬合而確定。在式6中，CD0和(he)S0分別(bie)為(wei)總(zong)環糊精和(he)總(zong)表面(mian)活性劑(ji)濃度。

從含(han)有(you)100 mMα-CD和1 mM洗滌劑的(de)溶(rong)液中確(que)定δ結合(he)(he)的(de)初(chu)始估(gu)計值(zhi)。這是合(he)(he)理(li)的(de)，因(yin)為我們滴定的(de)化學(xue)位移高(gao)達約70 mMα-CD，已接近最終(zhong)值(zhi)。δ界的(de)初(chu)始值(zhi)用(yong)于(yu)擬合(he)(he)Ka的(de)初(chu)始值(zhi)。Ka值(zhi)隨(sui)后用(yong)于(yu)確(que)定δ界的(de)理(li)論值(zhi)。重復該(gai)過程，直到(dao)Ka和δ界的(de)值(zhi)收斂。

在含有50 mMα-CD和50 mM表面活性劑的(de)樣品上，獲得(de)了混合時間(jian)為(wei)250 ms的(de)二維(wei)旋轉框(kuang)架懸置效(xiao)應光譜（2D-ROESY）。以(yi)（180°×180°）的(de)順序實現(xian)旋轉鎖定?×）場強(qiang)為(wei)2.5 kHz的(de)脈(mo)沖。借助2QF-COSY光譜對CD和表面活性劑共振進(jin)行(xing)分配(pei)。