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蛋白質外聚物中多糖的比例——結果與討論

來源:上海(hai)謂(wei)載(zai) 瀏覽 1450 次 發(fa)布(bu)時(shi)間:2021-10-12


三、結果與討論


3.1. 表(biao)面張力與蛋白(bai)質的關系:多糖比 在中(zhong)(zhong)觀實驗中(zhong)(zhong)


使用(yong) EPS 膠(jiao)體(ti)分數(shu),SFT 張力(li)測量來(lai)自 三個中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)宇(yu)宙(zhou)(zhou)實驗比較(jiao)海(hai)(hai)(hai)水和兩(liang)個沿(yan)海(hai)(hai)(hai) 水域如(ru)圖 1 所示。 表 1 總(zong)結(jie)了三個中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)宇(yu)宙(zhou)(zhou)實驗的(de)參(can)數(shu)。我們發現海(hai)(hai)(hai)洋雪和 在(zai) Control、WAF 和 DCEWAF 中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)觀察到海(hai)(hai)(hai)洋油(you)雪 (MS/MOS) 沉積,而 CEWAF 有(you)混濁的(de)懸浮液(ye), 最后(hou)一天只有(you)稀疏的(de)沉積物(Xu et al. 2018a)。 為了 開(kai)闊的(de)海(hai)(hai)(hai)洋條件(jian)(第(di) 4 天,用(yong)營養(yang)物質(zhi)修(xiu)正(zheng)(zheng))和第(di) 2 天 沿(yan)海(hai)(hai)(hai)水域(第(di) 3 天,用(yong)微生物濃縮(suo)物修(xiu)正(zheng)(zheng);第(di) 4 天, 用(yong)營養(yang)素修(xiu)正(zheng)(zheng))在(zai)圖 1 中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong),SFT 的(de)趨勢(shi)與 蛋白(bai)質(zhi):多糖比例的(de)函數(shu),均取自 來(lai)自水柱的(de) EPS 膠(jiao)體(ti)。 EPS膠(jiao)體(ti)組分用(yong)于 不(bu)同的(de)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)觀實驗集中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)在(zai) 8.3 倍 用(yong)微生物濃縮(suo)物修(xiu)正(zheng)(zheng)沿(yan)海(hai)(hai)(hai)水域的(de)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)宇(yu)宙(zhou)(zhou); 25 在(zai)廣闊的(de)海(hai)(hai)(hai)洋中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)的(de)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)宇(yu)宙(zhou)(zhou)時代; 而不(bu)是集中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)在(zai) 沿(yan)海(hai)(hai)(hai)水域的(de)中(zhong)(zhong)(zhong)(zhong)觀生態系統(tong)被養(yang)分修(xiu)正(zheng)(zheng)。


CEWAF 在水柱中保(bao)持含有油滴的(de)膠體材料(liao)的(de)乳(ru)(ru)液。 雖(sui)然 CEWAF 治療 導致(zhi)更穩定的(de)乳(ru)(ru)液,它們(men)的(de)酶促作用(Kamalanathan 等(deng)。 2018), MOS沉降效率(lv), 通過碳評(ping)估(gu) 質量平衡和(he)(he) 14C 分析(Xu 等(deng)人(ren)(ren),2018a)、多樣性和(he)(he) 豐(feng)富的(de)浮(fu)游植物(Bretherton 等(deng)人(ren)(ren),2018 年); 在正烷(wan)烴和(he)(he)生物標志物比(bi)較中觀察到的(de)生物降解程度(du)(Wade 等(deng)人(ren)(ren), 2017); 在這些(xie)實驗的(de)持續時間(jian)內,分子(zi)組成的(de)氧化變化(Hatcher 等(deng)人(ren)(ren),2018 年)似乎都大(da)大(da)減(jian)少(shao)了。



圖 1. SFT 與(yu)蛋白(bai)質多(duo)糖比的(de)比較(jiao) (蛋白(bai)質:多(duo)糖)在(zai)開闊的(de)海(hai)洋與(yu)兩個(ge)沿海(hai)環境中(zhong)。 這 蛋白(bai)質:多(duo)糖的(de)所有環境的(de)處(chu)理都顯示出類似的(de)趨勢(shi) 其(qi)中(zhong) CEWAF > DCEWAF > WAF ≥ Control 并且 SFT 的(de)趨勢(shi)是(shi) 與(yu)此模式相反。 每個(ge)數據(ju)點(dian)是(shi)一(yi)式三份的(de)平均(jun)值(3 個(ge)獨(du)立的(de) 每次(ci)治(zhi)療的(de)中(zhong)胚層和 5 次(ci) SFT 測量值 < 0.30 mN/m CEWAF 的(de)標(biao)準(zhun)(zhun)偏差,其(qi)他處(chu)理的(de)標(biao)準(zhun)(zhun)偏差 < 0.05 mN/m)。


EPS 膠體(ti)溶(rong)液的(de)(de)(de)(de)(de) SFT 與 蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)(更(geng)(geng)疏水)到多糖(tang)(更(geng)(geng)親水) 集中度,可(ke)以作為整體(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)相對(dui)度量(liang)(liang) 膠體(ti)部分(fen)的(de)(de)(de)(de)(de)疏水性(xing)。 此外(wai),圖1中的(de)(de)(de)(de)(de)數(shu)據 意(yi)味著石油和(he)/或 Corexit 的(de)(de)(de)(de)(de)存在導致增強 EPS 膠體(ti)的(de)(de)(de)(de)(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi):多糖(tang)比(bi)(bi)率(lv),但(dan)降低(di)(di)了 膠體(ti)部分(fen)的(de)(de)(de)(de)(de) SFT。 CEWAF 中蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)含量(liang)(liang)較(jiao)高(gao) 處(chu)(chu)理(li)(li)(li)(li)對(dui)應的(de)(de)(de)(de)(de)細菌(jun)計數(shu)高(gao)于其他處(chu)(chu)理(li)(li)(li)(li) 治療(Kamalanathan 等人(ren),2018 年;Doyle 等人(ren),2018 年)。 DCEWAF 還(huan)具(ju)有更(geng)(geng)高(gao)的(de)(de)(de)(de)(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)含量(liang)(liang)和(he)更(geng)(geng)高(gao)的(de)(de)(de)(de)(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi):多糖(tang) 比(bi)(bi) WAF 和(he)對(dui)照處(chu)(chu)理(li)(li)(li)(li)。 值得注意(yi)的(de)(de)(de)(de)(de)是(shi),當 與不(bu)同的(de)(de)(de)(de)(de)中宇(yu)(yu)宙實驗相比(bi)(bi),開闊的(de)(de)(de)(de)(de)海洋中宇(yu)(yu)宙的(de)(de)(de)(de)(de)油濃度高(gao)兩倍,相對(dui) DCEWAF 處(chu)(chu)理(li)(li)(li)(li)中的(de)(de)(de)(de)(de) Corexit 含量(liang)(liang)較(jiao)高(gao),即它們僅 ~6.3 倍稀釋(shi)的(de)(de)(de)(de)(de) CEWAF,而(er) DCEWAF 處(chu)(chu)理(li)(li)(li)(li)來自 用微(wei)生(sheng)物濃縮物修(xiu)正的(de)(de)(de)(de)(de)沿海水域約 15 倍 稀釋(shi)的(de)(de)(de)(de)(de) CEWAF 和(he)經過(guo)修(xiu)正的(de)(de)(de)(de)(de)營養(yang)物質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)(de)沿海水域是(shi) ~ 10 倍稀釋(shi)的(de)(de)(de)(de)(de) DCEWAF(表 1)。 因(yin)此,趨勢線的(de)(de)(de)(de)(de)斜率(lv) 可(ke)能受到 DCEWAF 中 Corexit 數(shu)量(liang)(liang)的(de)(de)(de)(de)(de)影(ying)響,并(bing)且 CEWAF 處(chu)(chu)理(li)(li)(li)(li) SFT 和(he)蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi):多糖(tang) 比(bi)(bi)率(lv)。 由(you)于其表面(mian)活(huo)性(xing)劑(ji)特性(xing),Corexit 降低(di)(di)了 SFT,但(dan)它 還(huan)增強了蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)(de)產生(sheng),導致比(bi)(bi)對(dui)照和(he) WAF 處(chu)(chu)理(li)(li)(li)(li)更(geng)(geng)高(gao)的(de)(de)(de)(de)(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi):多糖(tang)比(bi)(bi)率(lv)。 這(zhe) 相對(dui) SFT 和(he)蛋(dan)白(bai)質(zhi)(zhi)(zhi)(zhi):對(dui)照和(he) WAF 的(de)(de)(de)(de)(de)多糖(tang)位置 可(ke)能是(shi)由(you)膠體(ti)和(he)海水的(de)(de)(de)(de)(de)組成(cheng)和(he)濃度的(de)(de)(de)(de)(de)微(wei)小(xiao)差異產生(sheng)的(de)(de)(de)(de)(de)。


為了測(ce)試(shi)我們的(de)(de)初始 SFT 測(ce)量的(de)(de)可(ke)(ke)靠(kao)性 每個中宇宙(zhou)的(de)(de)源水,SFT 的(de)(de)關系由 沙卡維(wei)等人。 (2010) 可(ke)(ke)以使用:



其中(zhong)(zhong)σsw為(wei)(wei)海(hai)水(shui)的(de)(de)(de)SFT,σw為(wei)(wei)純水(shui)的(de)(de)(de)SFT,t為(wei)(wei) 溫(wen)度(du)(du)(°C),S 是(shi)鹽度(du)(du)(g/kg),源的(de)(de)(de) SFT 以下中(zhong)(zhong)宇(yu)宙的(de)(de)(de)水(shui)域計算為(wei)(wei)每個為(wei)(wei) 73.35 mN/m 中(zhong)(zhong)宇(yu)宙基于表 1 中(zhong)(zhong)給(gei)出(chu)的(de)(de)(de)鹽度(du)(du),溫(wen)度(du)(du)為(wei)(wei) 22.8 °C,純水(shui) SFT 為(wei)(wei) 72.6 mN/m。 采取(qu) 我們給(gei)出(chu)的(de)(de)(de)線性關系的(de)(de)(de) y 截距值(zhi)的(de)(de)(de)平均值(zhi) 圖 1 中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)每個中(zhong)(zhong)胚(pei)層,初始(shi)值(zhi)都在 < 2% RSD 內 來自計算的(de)(de)(de) 73.35 mN/m 值(zhi)。 然而(er),這個計算值(zhi) 用于不含EPS膠(jiao)體(ti)的(de)(de)(de)海(hai)水(shui),它甚至(zhi)可以改(gai)變SFT 低濃度(du)(du)時,以及(ji) WAF 和 西(xi)瓦夫。


從圖 1 中(zhong)可(ke)以明(ming)顯看出(chu),在(zai) EPS 膠體部(bu)分(fen)中(zhong), 蛋(dan)(dan)(dan)白質(zhi)(zhi):多(duo)糖(tang)(tang)比(bi)率(lv)與海水中(zhong)的(de)(de)(de) SFT 相關。 這(zhe)個 pH ~ 8 高于(yu)大(da)(da)多(duo)數蛋(dan)(dan)(dan)白質(zhi)(zhi)的(de)(de)(de) pI(pI 是等(deng)電點(dian)(dian), 這(zhe)是分(fen)子上(shang)的(de)(de)(de)凈(jing)電荷為(wei)(wei)零時的(de)(de)(de) pH 值)。 在(zai) 在(zai)海水 pH 值下,氨基酸(suan)(suan)的(de)(de)(de)羧(suo)酸(suan)(suan)位點(dian)(dian)處于(yu)解離形式,氨基帶(dai)正電荷為(wei)(wei) R-NH3+。 因(yin)此,蛋(dan)(dan)(dan)白質(zhi)(zhi)與酸(suan)(suan)性(xing)多(duo)糖(tang)(tang)之(zhi)間(jian)(jian)的(de)(de)(de)相互作用(yong)(yong) 由陰離子反應(ying)位點(dian)(dian)之(zhi)間(jian)(jian)的(de)(de)(de)相互作用(yong)(yong)控制 多(duo)糖(tang)(tang)和蛋(dan)(dan)(dan)白質(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)小陽離子反應(ying)位點(dian)(dian), 導致形成可(ke)溶性(xing)陰離子"蛋(dan)(dan)(dan)白質(zhi)(zhi)-多(duo)糖(tang)(tang)"聚集體(Ghosh 和 Bandyopadhyay 2012)。 這(zhe)些多(duo)糖(tang)(tang)蛋(dan)(dan)(dan)白復(fu)(fu)合物(wu)(wu)表(biao)現(xian)出(chu)廣泛的(de)(de)(de)特性(xing),包括它們的(de)(de)(de) 穩(wen)定(ding)(ding)(ding)空氣-水或(huo)油-水界面(mian)的(de)(de)(de)能力,以及增粘和 膠凝特性(xing)(Ghosh 和 Bandyopadhyay 2012)。 的(de)(de)(de)穩(wen)定(ding)(ding)(ding)性(xing) 當通(tong)過以下方法穩(wen)定(ding)(ding)(ding)時,油乳液(ye)(ye)(ye)(ye)液(ye)(ye)(ye)(ye)滴(di)預計會(hui)更(geng)高 與其他(ta)表(biao)面(mian)活(huo)性(xing)劑相比(bi),蛋(dan)(dan)(dan)白質(zhi)(zhi)-多(duo)糖(tang)(tang)復(fu)(fu)合物(wu)(wu) 分(fen)子或(huo)顆粒,或(huo)多(duo)糖(tang)(tang)或(huo)單獨的(de)(de)(de)蛋(dan)(dan)(dan)白質(zhi)(zhi)(Tcholakova 等(deng)。 2008)。 此外(wai),蛋(dan)(dan)(dan)白質(zhi)(zhi)傾(qing)向于(yu)通(tong)過在(zai)液(ye)(ye)(ye)(ye)滴(di)周圍(wei)提供(gong)更(geng)厚的(de)(de)(de)層和更(geng)大(da)(da)的(de)(de)(de)表(biao)面(mian)覆(fu)蓋來穩(wen)定(ding)(ding)(ding)乳液(ye)(ye)(ye)(ye) 界面(mian)面(mian)積,從而減(jian)少奧斯(si)特瓦爾德熟化過程(cheng)(即, 小尺寸(cun)油滴(di)的(de)(de)(de)消失以更(geng)大(da)(da)尺寸(cun)的(de)(de)(de)油滴(di)為(wei)(wei)代價 液(ye)(ye)(ye)(ye)滴(di)形成)在(zai)蛋(dan)(dan)(dan)白質(zhi)(zhi)穩(wen)定(ding)(ding)(ding)的(de)(de)(de)乳液(ye)(ye)(ye)(ye)中(zhong)。



圖 2. 使用(yong)沿海(hai)水域的中宇宙(zhou)實驗中的尺寸分(fen)(fen)數數據 用(yong)微生物濃(nong)縮(suo)物修正。 上(shang)面板顯示(shi)了 SFT 沿海(hai)中觀處理,按大小分(fen)(fen)數分(fen)(fen)組,來自水體(ti) 樣品。 a) < 0.45 μm,其中顆粒(li)已(yi)被過濾掉,b) EPS 膠(jiao)體(ti)部(bu)分(fen)(fen)(< 0.45 μm 和 > 3 kDa,8.3x 濃(nong)縮(suo)),和 c) < 3 kDa 的"真正溶解"部(bu)分(fen)(fen)。 下面板表示(shi)有機 相同尺寸部(bu)分(fen)(fen)的碳(tan),d) DOC,溶解的有機碳(tan),e) 膠(jiao)體(ti)有機碳(tan),和 f) 真正溶解。


雖然(ran)我們的(de)討論集中在蛋白(bai)質和多糖(tang)(tang)(tang)的(de)非共(gong)價(jia)(jia)相互作(zuo)用上,但蛋白(bai)質和多糖(tang)(tang)(tang)之(zhi)間的(de)共(gong)價(jia)(jia)鍵(jian) 當天然(ran)狀(zhuang)態作(zuo)為蛋白(bai)聚糖(tang)(tang)(tang)存在時,多糖(tang)(tang)(tang)存在 或糖(tang)(tang)(tang)蛋白(bai)。 此外,共(gong)價(jia)(jia)交聯可(ke)(ke)以通過(guo) UVB 和 ROS 效應(ying)(Sun 等人,2017 年)。 之(zhi)間的(de)共(gong)價(jia)(jia)鍵(jian) 蛋白(bai)質中谷(gu)氨(an)酰(xian)胺的(de)羧基和賴氨(an)酸(suan)的(de)氨(an)基 也可(ke)(ke)以通過(guo)微生物釋放轉谷(gu)氨(an)酰(xian)胺酶形成(cheng)分子(McClements 2011)。 所有(you)共(gong)價(jia)(jia)鍵(jian)合過(guo)程都會 促進(jin) EPS-Corexit-油-水乳液(ye)的(de)穩定性。


3.2. 中觀實驗中尺寸分數的表面張力


不(bu)同尺(chi)寸的(de) SFT(圖(tu) 2a、b、c)和(he)有(you)(you)(you)機碳(tan)(2d、2e、2f) 最(zui)后一天水(shui)(shui)柱(zhu)樣(yang)品中的(de)餾(liu)分和(he)處理 中宇宙實驗的(de)結果(guo),使用經過修正的(de)沿(yan)海水(shui)(shui) 沿(yan)海微生(sheng)物(wu)(wu)濃(nong)縮物(wu)(wu)。 尺(chi)寸分數(shu)是溶解的(de) (≤0.45 um 部分,沒(mei)有(you)(you)(you)操作定義的(de)顆粒),EPS 膠(jiao)體(ti)(ti)相(xiang)(≤0.45 um and ≥ 3 kDa),真正溶解的(de) (≤3 kDa) 不(bu)含 EPS 膠(jiao)體(ti)(ti)。 頂部面板顯示(shi)(shi) SFT 測(ce)量值,下面的(de)面板是有(you)(you)(you)機碳(tan)濃(nong)度,和(he) 對(dui)應(ying)測(ce)量的(de)三個尺(chi)寸分數(shu)對(dui)齊 垂直。 所(suo)有(you)(you)(you)處理,Control、WAF、CEWAF 和(he) DCEWAF,都是 代表。 圖(tu) 2a 和(he) c 所(suo)示(shi)(shi)的(de)樣(yang)品直接來自(zi) mesocosm,而圖(tu) 2b 的(de)膠(jiao)體(ti)(ti)部分濃(nong)縮了(le) 8.3 次。


SFT(圖 2)結(jie)果表明 EPS 膠體相是 導致(zhi) SFT 變(bian)化(hua)的(de)(de)(de)尺寸(cun)(cun)(cun)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)數(shu)。 這個觀察(cha) 取自 2c,其中(zhong)真正(zheng)溶(rong)解(jie)的(de)(de)(de)尺寸(cun)(cun)(cun)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)數(shu)是一致(zhi)的(de)(de)(de) ~73.2 mN/m at 所有(you)處(chu)理(li)(li)。 此(ci)外,變(bian)化(hua)較小 溶(rong)解(jie)部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)是 EPS 膠體部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)與(yu) 真正(zheng)解(jie)散了(le)。 單向方(fang)差(cha)(cha)(cha)(cha)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)析用于評估潛力(li)(li) 圖 2a 和(he) b 中(zhong)處(chu)理(li)(li)之(zhi)間的(de)(de)(de)差(cha)(cha)(cha)(cha)異,溶(rong)解(jie)和(he) EPS 膠體部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)之(zhi)間的(de)(de)(de)差(cha)(cha)(cha)(cha)異。 方(fang)差(cha)(cha)(cha)(cha)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)析在 alpha 下運行 0.05 的(de)(de)(de)水平(ping)。 對照 SFT 值顯示無顯著差(cha)(cha)(cha)(cha)異 (p = 0.26) 在圖 2a 的(de)(de)(de)溶(rong)解(jie) (< 0.45 μm) 部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)和(he)圖 2b 的(de)(de)(de) EPS 膠體部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)之(zhi)間。 然而,有(you)一個顯著的(de)(de)(de) 圖 2a 和(he) b 中(zhong)相同(tong)尺寸(cun)(cun)(cun)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)數(shu)之(zhi)間的(de)(de)(de)差(cha)(cha)(cha)(cha)異 其他處(chu)理(li)(li),如(ru) WAF、CEWAF 和(he) DCEWAF,分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)別(bie)為 0.002、0.006 和(he) 0.016。 這些 結(jie)果是值得注意的(de)(de)(de),因為它們表明濃縮(suo)的(de)(de)(de) EPS 膠體影響了(le)控制中(zhong)水的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)子間作(zuo)用力(li)(li) 在 SFT 中(zhong)與(yu)未集中(zhong)的(de)(de)(de)那些沒有(you)太(tai)大區別(bie) 無顆粒的(de)(de)(de)溶(rong)液。 然而,其他治療(liao)方(fang)法 WAF, CEWAF 和(he) DCEWAF 之(zhi)間具有(you)更(geng)強的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)子間作(zuo)用力(li)(li) EPS膠體部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)表面的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)子比溶(rong)解(jie)部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)的(de)(de)(de)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)子多。 這強烈表明 EPS 膠體分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)數(shu) 與(yu)溶(rong)解(jie)部(bu)(bu)(bu)分(fen)(fen)(fen)(fen)(fen)相比,對 SFT 的(de)(de)(de)影響更(geng)大。


圖(tu) 2 中(zhong)的(de)有(you)機(ji)碳(tan)(tan)表明(ming)大部分(fen)溶(rong)解(jie)的(de) 部分(fen),圖(tu) 2d,由低分(fen)子量碳(tan)(tan)組成,因為總溶(rong)解(jie)部分(fen),圖(tu) 2f,幾乎等于 有(you)機(ji)碳(tan)(tan)濃度中(zhong)的(de)溶(rong)解(jie)分(fen)數。 膠(jiao)體 餾分(fen)(圖(tu) 2e)表明(ming)超(chao)濾已去除了(le) 85% 到(dao) 95% 的(de) 溶(rong)解(jie)部分(fen)的(de)有(you)機(ji)碳(tan)(tan)。 這可能(neng)(neng)表明(ming) 5% 到(dao) 15% 的(de) CEWAF 可能(neng)(neng)保(bao)留在 EPS 膠(jiao)體部分(fen)中(zhong), 表明(ming) SFT 的(de)降低(圖(tu) 2b)也受 Corexit 的(de)影響(xiang) 和 WAF。 然而,使(shi)用 SFT 與(yu) Corexit 濃度數據, 圖(tu) 4b,即(ji)使(shi)是(shi) 15% 的(de) Corexit 也無(wu)法解(jie)釋 在圖(tu) 1 的(de) CEWAF 處理中(zhong)測量的(de) SFT 降低。


3.3. 使用顯微鏡觀察界(jie)(jie)面(空氣(qi)/水)相(xiang)互作用 模型分子的混合物(wu)顯示在(zai)空氣(qi)-水中富(fu)集的蛋白質 界(jie)(jie)面


四種治(zhi)療(liao)(liao)的(de)(de)(de)(de)共聚(ju)焦激光(guang)掃描顯(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)微(wei)鏡 (CLSM) 帶有模(mo)型(xing) EPS 組件的(de)(de)(de)(de)處(chu)理(li)(li)如圖(tu) 3 所示(shi)。 ASW 顯(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)示(shi)在(zai)(zai)左側 BSA 的(de)(de)(de)(de) 0.1% 垂(chui)直(zhi)系列(lie)溶液(ye)(ye)中 右(you)邊是(shi)(shi)一系列(lie) 0.1% 的(de)(de)(de)(de)海(hai)藻(zao)(zao)(zao)酸(suan)(suan)(suan)溶液(ye)(ye)。 橫向(xiang), 面(mian)(mian)(mian)(mian)(mian)板(ban)顯(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)示(shi)了 Corexit、CEWAF、WAF 的(de)(de)(de)(de)相應處(chu)理(li)(li), 和(he)(he)(he)對(dui)照,用于(yu) BSA 和(he)(he)(he)海(hai)藻(zao)(zao)(zao)酸(suan)(suan)(suan)溶液(ye)(ye)。 綠(lv)色熒光(guang)探(tan)針 CTC 突出顯(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)示(shi)與陰離子結合(he)的(de)(de)(de)(de)親水性 Ca2+ 多(duo)(duo)糖和(he)(he)(he)蛋白質(zhi)的(de)(de)(de)(de)區域。 對(dui)于(yu)海(hai)藻(zao)(zao)(zao)酸(suan)(suan)(suan)和(he)(he)(he) BSA實驗,單(dan)獨使用Corexit就可(ke)以分(fen)散(san)(san)(san)模(mo)型(xing)分(fen)子 無界(jie)(jie)面(mian)(mian)(mian)(mian)(mian)積聚(ju)。 圖(tu)像也顯(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)示(shi)出明(ming)亮密集(ji) 微(wei)聚(ju)集(ji)體中較高傾向(xiang)的(de)(de)(de)(de)綠(lv)色熒光(guang) Corexit 比在(zai)(zai)其(qi)他(ta)治(zhi)療(liao)(liao)中看到(dao)的(de)(de)(de)(de)要(yao)多(duo)(duo)。 海(hai)藻(zao)(zao)(zao)酸(suan)(suan)(suan)面(mian)(mian)(mian)(mian)(mian)板(ban)全部(bu)顯(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)示(shi) 聚(ju)集(ji)體的(de)(de)(de)(de)分(fen)散(san)(san)(san),而 BSA 面(mian)(mian)(mian)(mian)(mian)板(ban)顯(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)示(shi)主(zhu)要(yao)在(zai)(zai)界(jie)(jie)面(mian)(mian)(mian)(mian)(mian)處(chu)的(de)(de)(de)(de)蛋白質(zhi)。 CEWAF 海(hai)藻(zao)(zao)(zao)酸(suan)(suan)(suan)和(he)(he)(he) BSA 可(ke)以生成 清晰的(de)(de)(de)(de)界(jie)(jie)面(mian)(mian)(mian)(mian)(mian)層(ceng)。 CEWAF 中的(de)(de)(de)(de) BSA 顯(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)示(shi)聚(ju)合(he) 當(dang)它(ta)們向(xiang)上(shang)(shang)擴(kuo)散(san)(san)(san)時(shi)(shi)在(zai)(zai)垂(chui)直(zhi)方向(xiang)上(shang)(shang)被夸大(da) 隨著圖(tu)像曝光(guang)的(de)(de)(de)(de)時(shi)(shi)間。 此(ci)外,BSA CEWAF 顯(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)示(shi)聚(ju)集(ji)體似乎在(zai)(zai)液(ye)(ye)體表面(mian)(mian)(mian)(mian)(mian)上(shang)(shang)方,因為(wei)它(ta)們是(shi)(shi) 在(zai)(zai)未顯(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)示(shi)的(de)(de)(de)(de)泡沫層(ceng)之內和(he)(he)(he)之上(shang)(shang)。 具有主(zhu)要(yao)親水部(bu)分(fen)的(de)(de)(de)(de)控制處(chu)理(li)(li)表現出較少的(de)(de)(de)(de)分(fen)散(san)(san)(san) 和(he)(he)(he)不太明(ming)顯(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)的(de)(de)(de)(de)界(jie)(jie)面(mian)(mian)(mian)(mian)(mian)層(ceng)。 雖(sui)然(ran)垂(chui)直(zhi)尺度較小 對(dui)于(yu) BSA 圖(tu)像比對(dui)于(yu)海(hai)藻(zao)(zao)(zao)酸(suan)(suan)(suan)圖(tu)像,仍然(ran)很(hen)明(ming)顯(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)(xian) 海(hai)藻(zao)(zao)(zao)酸(suan)(suan)(suan)分(fen)散(san)(san)(san)在(zai)(zai)整個體積中,而 BSA 迅速擴(kuo)散(san)(san)(san)到(dao)界(jie)(jie)面(mian)(mian)(mian)(mian)(mian)。 唯(wei)一的(de)(de)(de)(de)例外是(shi)(shi) Corexit 處(chu)理(li)(li)顯(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)(xian)示(shi)沒有界(jie)(jie)面(mian)(mian)(mian)(mian)(mian)積聚(ju)和(he)(he)(he)完(wan)全分(fen)散(san)(san)(san) 海(hai)藻(zao)(zao)(zao)酸(suan)(suan)(suan)和(he)(he)(he)BSA。


相(xiang)(xiang)(xiang)同放大倍數下 BSA 聚(ju)集體(ti)的(de) SEM 圖(tu)像(圖(tu) 3b) 在(zai)(zai) Corexit(左)和(he) ASW 中(zhong)用 0.1% BSA 溶(rong)液制(zhi)備 來自與(yu)(yu)圖(tu) 3a 中(zhong)相(xiang)(xiang)(xiang)同的(de)溶(rong)液的(de)對照處理(li)(右)。 這 Corexit 處理(li)(左圖(tu) 3b)顯(xian)示(shi)來自液體(ti)的(de)微聚(ju)集體(ti) 階(jie)段。 對照處理(li)(圖(tu) 3b 右)顯(xian)示(shi)了一個大結晶 蛋(dan)白質聚(ju)集體(ti)。 圖(tu) 3a 和(he) 3b 中(zhong)描繪的(de)結果(guo)支持 靜(jing)電相(xiang)(xiang)(xiang)互作用和(he)共價鍵作用的(de)重要性 在(zai)(zai)微聚(ju)集體(ti)形(xing)成中(zhong)(Corexit 與(yu)(yu) Ca2+ 離子突(tu)出顯(xian)示(shi) CTC) 和(he) Ca2+ 螯合中(zhong)的(de)配位共價鍵 CTC 和(he)陰離子親水部分(CEWAF、WAF 和(he)對照 處理(li))形(xing)成比(bi) Corexit 更(geng)少但更(geng)大的(de)聚(ju)集體(ti) 治療。


圖(tu)(tu) 3.a. 使用氯四(si)環素(su) (CTC) 熒(ying)光(guang)探針染色的(de)(de) CLSM 圖(tu)(tu)像(xiang)在(zai)不同(tong)處(chu)理(li)中(zhong)(zhong)的(de)(de)空氣/水(shui)界面關系 多糖和(he)蛋白(bai)質的(de)(de)親水(shui)性 Ca2+ 結(jie)合陰離(li)子區域。 垂直面板組在(zai)左(zuo)側(ce)代表 0.1% BSA 蛋白(bai)和(he) 0.1% 右側(ce)的(de)(de)海藻(zao)酸 (AA),每個都(dou)在(zai) ASW 中(zhong)(zhong)。 水(shui)平面板組比較了不同(tong)處(chu)理(li)中(zhong)(zhong)的(de)(de) BSA 和(he) AA 溶液(ye)。 比例尺表示(shi) 每個方(fang)(fang)向(xiang) 100 μm。 灣 BSA 的(de)(de) SEM 圖(tu)(tu)像(xiang) 在(zai)相同(tong)放大倍(bei)數下聚集(ji)顯(xian)示(shi) 比例尺為 3 μm。 總量(liang)來(lai)(lai)自 0.1% Corexit 中(zhong)(zhong) ASW 中(zhong)(zhong)的(de)(de) BSA 解(jie)決方(fang)(fang)案(an),左(zuo)側(ce)和(he) BSA 中(zhong)(zhong) 控(kong)制治療,對。 兩(liang)幅(fu) SEM 圖(tu)(tu)像(xiang)均(jun)來(lai)(lai)自 相應的(de)(de)解(jie)決方(fang)(fang)案(an)如(ru)圖(tu)(tu) 3 所示(shi)。 Corexit 處(chu)理(li)顯(xian)示(shi)分散(san)的(de)(de)微聚集(ji)體(ti) 來(lai)(lai)自水(shui)相。 控(kong)制處(chu)理(li) 顯(xian)示(shi)大的(de)(de)結(jie)晶(jing)蛋白(bai)質聚集(ji)體(ti)。



圖 4.a) 顯(xian)(xian)示(shi)(shi)了(le)海水中模型(xing)蛋(dan)白質的(de) SFT 作為(wei)其(qi)濃度自然對數的(de)函數。 BSA 蛋(dan)白的(de) CMC 為(wei) 6–8 mg/L。 b) 顯(xian)(xian)示(shi)(shi) Corexit 的(de) CMC 濃度為(wei) 22 mg/L。


表(biao) 2 SFT 和 CMC 比(bi)較模型(xing)蛋(dan)(dan)白質(zhi)和酸性多(duo)糖(tang)。 雖然(ran)Corexit 更(geng)有效地降低 SFT,EPS 模型(xing)成分(fen)更(geng)有效 因為需(xu)要低得多(duo)的濃度(du)(du)才能(neng)開(kai)始乳化(蛋(dan)(dan)白質(zhi))和 穩定成分(fen)(酸性多(duo)糖(tang);結合大(da)分(fen)子并添加 粘(zhan)度(du)(du))。



3.4. 臨界膠束濃度的表面張力測量 模型生物分子


EPS 包括各種蛋白(bai)質(zhi)和酸(suan)性(xing)(xing)多(duo)糖(tang),因(yin)此 SFT 可以 用(yong)于(yu)對模型蛋白(bai)和多(duo)糖(tang)進行 CMC 測試(shi)。 在 圖 4a,BSA 的 CMC,一種分(fen)(fen)子(zi)量為 66 kDa 的小而穩定的中(zhong)等非反應性(xing)(xing)蛋白(bai)質(zhi),因(yin)其(qi)缺乏作用(yong)而經常(chang)使(shi)用(yong) 在許多(duo)生化反應中(zhong))的 CMC 為 6–8 mg/L,SFT 為 68 毫牛(niu)/米。 圖 4b 顯(xian)示(shi)了廣泛使(shi)用(yong)的分(fen)(fen)散劑(ji)(ji) Corexit 的 CMC 在深水地平線馬孔多(duo)漏油事件中(zhong)。 表(biao)(biao)(biao)(biao) 2 比較 模型分(fen)(fen)子(zi)和 Corexit 的有(you)(you)(you)(you)效(xiao)性(xing)(xing)和效(xiao)率(lv) 降(jiang)低(di)表(biao)(biao)(biao)(biao)面(mian)張力。 就表(biao)(biao)(biao)(biao)面(mian)活(huo)性(xing)(xing)分(fen)(fen)子(zi)而言(yan),效(xiao)率(lv)隨著形(xing)成(cheng)(cheng)表(biao)(biao)(biao)(biao)面(mian)活(huo)性(xing)(xing)劑(ji)(ji)所(suo)需的表(biao)(biao)(biao)(biao)面(mian)活(huo)性(xing)(xing)劑(ji)(ji)濃度而增加 CMC是最低(di)的。 然而,表(biao)(biao)(biao)(biao)面(mian)活(huo)性(xing)(xing)劑(ji)(ji)的有(you)(you)(you)(you)效(xiao)性(xing)(xing) 當(dang)它在更(geng)(geng)大程度上降(jiang)低(di)表(biao)(biao)(biao)(biao)面(mian)張力時(shi)(shi)更(geng)(geng)高。 這(zhe) 商業分(fen)(fen)散劑(ji)(ji) Corexit 更(geng)(geng)有(you)(you)(you)(you)效(xiao)但效(xiao)率(lv)較低(di) 比 EPS 成(cheng)(cheng)分(fen)(fen)降(jiang)低(di) SFT(表(biao)(biao)(biao)(biao) 2)。 所(suo)以,Corexit 有(you)(you)(you)(you)效(xiao) 當(dang)它位于(yu) CMC 時(shi)(shi),將 SFT 降(jiang)低(di)到大約(yue) 42–32 mN/m。 蛋白(bai)質(zhi) BSA 和酸(suan)性(xing)(xing)多(duo)糖(tang)(帶有(you)(you)(you)(you)羧基部分(fen)(fen)的葡萄糖(tang)醛酸(suan); 帶有(you)(you)(you)(you)硫酸(suan)根(gen)的角叉(cha)菜膠是 EPS 的兩種典型成(cheng)(cheng)分(fen)(fen)), 在促進膠束的兩親分(fen)(fen)子(zi)自組(zu)裝方面(mian)非常(chang)有(you)(you)(you)(you)效(xiao)。 雖然模型組(zu)件并沒有(you)(you)(you)(you)降(jiang)低(di)表(biao)(biao)(biao)(biao)面(mian)張力 作為 Corexit,它們在形(xing)成(cheng)(cheng)小于(yu) 2 倍的膠束時(shi)(shi)更(geng)(geng)有(you)(you)(you)(you)效(xiao) Corexit 達到 CMC 所(suo)需的濃度。


3.5. pH變化對模型生物分子表面張力的影響


葡(pu)萄糖(tang)(tang)醛(quan)酸(suan),一種酸(suan)性多糖(tang)(tang),在(zai)(zai)低(di)(di)濃度(du)(du)下(xia)降低(di)(di) SFT 濃度(du)(du),符合(he)預期(qi)。 然而(er),BSA 蛋白會導致增(zeng)(zeng)(zeng)加(jia)(jia) 在(zai)(zai)低(di)(di)濃度(du)(du)的(de)(de)(de)(de) SFT 中(zhong)(圖 5)。 據我們(men)所知,文獻(xian)中(zhong)尚未記錄生(sheng)物(wu)聚(ju)合(he)物(wu)的(de)(de)(de)(de)這種效應。 在(zai)(zai)這種情況下(xia) BSA,低(di)(di)濃度(du)(du)乳化劑或(huo)表(biao)面(mian)活(huo)性劑,標準免費 氣水(shui)界面(mian)的(de)(de)(de)(de)能量經(jing)歷(li)熵(shang)的(de)(de)(de)(de)增(zeng)(zeng)(zeng)加(jia)(jia),因為 分(fen)(fen)子(zi)(zi)的(de)(de)(de)(de)疏(shu)水(shui)部(bu)分(fen)(fen)從水(shui)性 相到空氣。 在(zai)(zai)重新定向(xiang)疏(shu)水(shui)性尾(wei)部(bu)的(de)(de)(de)(de)過程中(zhong) 分(fen)(fen)子(zi)(zi)進入(ru)空氣,有序的(de)(de)(de)(de)水(shui)分(fen)(fen)子(zi)(zi)的(de)(de)(de)(de)殼(ke) 尾(wei)部(bu)周(zhou)圍被(bei)噴(pen)射到大量水(shui)相中(zhong)。 隨(sui)著(zhu)不利的(de)(de)(de)(de)熵(shang)增(zeng)(zeng)(zeng)加(jia)(jia),SFT 增(zeng)(zeng)(zeng)加(jia)(jia)。 然后隨(sui)著(zhu) 乳化劑/表(biao)面(mian)活(huo)性劑分(fen)(fen)子(zi)(zi)在(zai)(zai)表(biao)面(mian)的(de)(de)(de)(de)濃度(du)(du), 較高的(de)(de)(de)(de)熵(shang)消散并且表(biao)面(mian)張力降低(di)(di)(Angarska 等(deng)。 2004; Warszynski 等(deng)人。 1998年; Wang 和 Yoon 2004)。 這種效果 當生(sheng)物(wu)聚(ju)合(he)物(wu)的(de)(de)(de)(de)含量低(di)(di)到可以忽略(lve)不計時 疏(shu)水(shui)性,如葡(pu)萄糖(tang)(tang)醛(quan)酸(suan)的(de)(de)(de)(de)情況。



圖 5.a) 葡(pu)糖(tang)醛酸(suan)(suan),一(yi)種(zhong)酸(suan)(suan)性多糖(tang),證明在(zai)(zai)低(di)濃(nong)度(du)下(xia)(xia) SFT 降低(di)。 b) 相反,BSA 蛋白在(zai)(zai)低(di) 專注。 然而(er),BSA 在(zai)(zai)較高濃(nong)度(du)下(xia)(xia)再次(ci)降低(di)。 低(di)濃(nong)度(du)下(xia)(xia) SFT 的(de)這種(zhong)增加可(ke)以(yi)通過水(shui)中 pH 值的(de)降低(di)來解(jie)釋 由 BSA 引起,圖 6。



圖(tu) 6. 改變(bian) BSA 蛋白的溶液中(zhong)糖(tang)醛酸(suan)(葡(pu)萄糖(tang)醛酸(suan))濃度(du)為 3 mg/L 時的 SFT(菱形)和 pH(空心(xin)方(fang)塊) 濃度(du)。 CMC,臨界膠束濃度(du),在 BSA 濃度(du)為 10 mg/L + 3 mg/L 葡(pu)萄糖(tang)醛酸(suan)。 pH 值變(bian)化約(yue) 0.3 個單位 SFT 范圍為 7 mN/m。


盡管有(you)海(hai)水的(de)(de)(de)(de)(de)(de)緩沖能(neng)力(li),但(dan)圖 6 中的(de)(de)(de)(de)(de)(de)數據顯示(shi) 由 < 1 pH 的(de)(de)(de)(de)(de)(de)生物(wu)分(fen)子的(de)(de)(de)(de)(de)(de)酸度引起(qi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de) pH 變(bian)化 單位與(yu) SFT 的(de)(de)(de)(de)(de)(de)變(bian)化呈負(fu)相(xiang)關(guan)。 這表明即使 pH 值的(de)(de)(de)(de)(de)(de)微小變(bian)化可能(neng)是膠束形成的(de)(de)(de)(de)(de)(de)重(zhong)要因素(su) (CMC 濃(nong)度,~10 mg/L BSA + 3 mg/L 葡萄糖醛酸,圖 6)。 此外,在較低(di)的(de)(de)(de)(de)(de)(de) pH 值下,有(you)較高濃(nong)度的(de)(de)(de)(de)(de)(de)游離(li)(li) 氫(qing)離(li)(li)子導致氫(qing)鍵(jian)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)電位增加。


這些結(jie)果的(de)重要性在(zai)于,即使在(zai)小范圍內(nei), pH 值(zhi)的(de)變化(hua)可(ke)能(neng)會(hui)(hui)影響分子(zi)間的(de)電荷關系和 誘導分子(zi)自組裝。 欽(qin)等人。 1998年(nian)指出鈣 由(you)于唐南效應(ying),內(nei)部凝(ning)(ning)膠可(ke)能(neng)會(hui)(hui)過飽和,例如(ru) pH 值(zhi)的(de)輕(qing)微增加(jia)不會(hui)(hui)導致(zhi)結(jie)晶 海水會(hui)(hui)導致(zhi)凝(ning)(ning)膠內(nei)沉淀,特別是(shi)在(zai) 具有高生產力的(de)微環境。



蛋白質外聚物中多糖的比例——摘要、簡介

蛋白質外聚物中多糖的比例——方法

蛋白質外聚物中多糖的比例——結果與討論

蛋白質外聚物中多糖的比例——結論、致謝!