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香豆素和磷脂混合物單分子層膜中的分子相互作用的界面性質——材料和方法
來源:上海謂載(zai) 瀏(liu)覽 698 次 發布時間:2021-11-01
二、材料和方法
2.1. 材料
香豆(dou)素 (99% 純(chun)度(du)), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphorac-(1-glycerol), 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoethanola 我(wo)的和 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine(所有 純(chun)度(du) > 99% 的磷脂)購自 Sigma– 奧爾德(de)里(li)奇(美國圣(sheng)路易斯)。 超純(chun)水(shui) (18.2 ΩX.cm-1 次方) 是 從 Synergy Milli-Q 系統 (Billerica, USA) 獲得。
2.2.π-A 和 ?VA 等溫線
CMR 和脂(zhi)質溶液(ye)在(zai)氯(lv)仿中制備,濃度(du)為(wei) 1 mg.mL-1。 隨后,CMR/的(de)不同解決(jue)方(fang)案 不同摩爾比的(de)脂(zhi)質 (XCMR = 0, 0.250, 0.375, 0.500, 0.675, 獲(huo)得了 0.750、0.875 和 1)。 然后,這些餾(liu)分(fen)的(de) 10 mL 均勻地(di)沉積(ji)在(zai)檸檬(meng)酸(suan)鹽(yan)(檸檬(meng)酸(suan))-磷(lin)酸(suan)鹽(yan)上 (磷(lin)酸(suan)鈉) 緩(huan)沖液(ye) (pH 7.4 和離子(zi)強(qiang)度(du) 10-3 次(ci)方(fang) M) 亞相 (v = 20 毫升) 使(shi)用漢密爾頓微移液(ye)器。 實(shi)驗 在(zai)恒定的(de)對稱壓(ya)縮下進行 速(su)度(du)15mm.min-1次(ci)方(fang)(溫(wen)度(du)23±0.2圈),等(deng)待后 15 分(fen)鐘(zhong)以確保溶劑蒸發。 等(deng)溫(wen)線(xian)(xian)在(zai) Kibron Langmuir 槽(cao)(Microtrough XS,Helsinki, 芬蘭)。 表面壓(ya)力測(ce)量精度(du)為(wei) ±0.01 mN.m-1次(ci)方(fang) . 通過(guo)振動測(ce)量表面電位 板法(Microspot,Kibron,赫爾辛基,芬蘭),精度(du)為(wei) ±0.1 mV。π-A 和 ΔVA 等(deng)溫(wen)線(xian)(xian)重(zhong)復(fu)三(san)(san)次(ci),標準(zhun)偏(pian)差約為(wei) 5%,使(shi)用至少三(san)(san)個 不同的(de)解決(jue)方(fang)案。
2.3. LB薄膜的形態分析
純單(dan)層(ceng)和(he)混合單(dan)層(ceng)被壓(ya)縮并(bing)保持在(zai) p = 20 mN.m-1 次方的(de)目標壓(ya)力下 . 隨(sui)后,Langmuir 薄膜被轉(zhuan)移到新切割的(de)云母(mu)上(shang),浸(jin)漬 基(ji)板以 2 mm.min-1 次方的(de)恒定速率以控制 單(dan)層(ceng)的(de)形成。 所有測量(liang)均使用 SPM 9700 原子(zi)力顯微鏡(Shimadzu 儀(yi)器有限(xian)公司,日本(ben))在(zai)非接觸模(mo)式。 懸臂與 一(yi)個(ge)硅原子(zi)力顯微鏡探頭(tou)(Nanoworld,日本(ben),共振頻率 = 300 kHz,彈簧常(chang)數(shu) = 42 Nm-1次方 ) 被使用。 圖片 (512 每行點(dian))以 1.0 Hz 的(de)掃描速率在(zai)一(yi)次掃描中收集(ji) 面積 5.0 ? 5.0 mm 在(zai)每個(ge)樣(yang)品(pin)的(de)四(si)個(ge)不同區域上(shang)的(de)至少兩個(ge)不同樣(yang)品(pin)上(shang)此外(wai),還獲得了圖像 并(bing)使用 AFM Gwyddion 軟件(jian) (Necas, 2008) 進行分析。
香豆素和磷脂混合物單分子層膜中的分子相互作用的界面性質——摘要、簡介
香豆素和磷脂混合物單分子層膜中的分子相互作用的界面性質——材料和方法